方法：1) 10%水合氯醛2ml腹腔注射麻醉小鼠，浸泡在75%乙醇中。2) 在無菌條件下打開胸、腹腔，暴露心臟，依次剪去胸腹腔器官直至暴露主動脈，完整分離主動脈，放入35mm無菌平皿中，加入1 ml無菌PBS( pH 7.2) ，迅速轉移至超凈臺。3) 用D-Hanks液反復沖洗，去除殘留血液，用鑷子小心剝離主動脈外的脂肪組織，小心剝去外膜，至血管光滑透明。5)將主動脈放入DMEM液(含4.5g/...

淋巴細胞主要來源：脾臟、外周血等外周血單個核細胞：淋巴細胞+單核細胞分離方法：密度梯度離心法，因為血液中各成分的比重存在差異，因此得以分離。第一層為血漿層；第二層為環狀乳白色淋巴細胞層；第三層為透明分離液層；第四層為白細胞層；第五層紅細胞。方法：（1）眼球取血，將血液滴入肝素抗凝管中，加入PBS按1：1稀釋血液（一般采血管2mL+2mL）。（2）取淋巴細胞分離液2mL于15mL滅菌離心管中待用。（...

1.C57小鼠頸椎脫臼處死后浸泡于75%乙醇中消毒3~5 min后斷頭置于玻璃培養皿中，打開顱腔后取出全腦置于盛有冷D-Hanks'液的玻璃培養皿中解剖去除小腦、間腦(包括海馬)。2. 隨后將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以吸除軟腦膜及腦膜大血管后置于新的含冷D-Hanks'液玻璃培養皿中，用細解剖鑷去除大腦白質、殘余大血管和軟腦膜，保留大腦皮質。3. 用D-Han...

（1）取成牛眼球，75%酒精消毒，取出周圍多余組織，用PBS洗3次，用PBS流水沖洗眼球3次。（2）沿角膜緣剪開眼球，棄掉角膜、晶體、玻璃體等部分，將眼球后半部翻轉取出視網膜，將其剪碎平皿內加入適量0.25%的胰酶，在37℃培養箱中，采用分次消化，每次消化20min約8次。（3）每次消化后取上清液，并加入等量的含10%的DMEM培養基，輕輕混勻，中和胰酶的消化，防止消化過度。用200目細胞過濾篩子...

（1）麻醉及灌流：將大鼠以7%水合氯醛（0.5ml/100g）麻醉，75%乙醇消毒后移至工作臺，0.45mm頭皮針連接蠕動泵，打開蠕動泵，調整蠕動泵灌流速度為7ml/min，抽取37℃預熱的灌流液I并排空裝置內的空氣。打開腹腔，將胃腸結構推向左腹上側，分離出下腔靜脈（腎上段）、肝門靜脈，剪開隔膜，動脈夾夾閉下腔靜脈肝上段，將頭皮針插入下腔靜脈（腎上段），動脈夾夾閉固定，打開蠕動泵，灌注37℃預熱的...